免疫动物后通过流式分选记忆性B细胞,经过单细胞反转录体系成为全长cDNA,并通过相应的兼并PCR引物扩增抗体序列的可变区,最后根据表达载体的特性设计表达引物,将序列构建到表达载体上,少量表达后检测抗体和目的细胞的亲和力。通过单B细胞筛选可以大大缩短获得抗体序列的时间。
图、单B细胞分选的流式设门策略。